Polymerase Chain Reaction (PCR) dan Pengujian STD

Analisis reaksi rantai polimer (PCR) adalah teknik laboratorium. Tujuan pengujian PCR adalah untuk menemukan sejumlah kecil DNA dalam sampel, menggunakan proses yang dikenal sebagai amplifikasi. Selama amplifikasi PCR, DNA yang diinginkan disalin berulang kali hingga cukup untuk dianalisis dan dideteksi. Sebagai contoh, PCR dapat digunakan untuk mengidentifikasi sejumlah kecil DNA dari organisme yang menyebabkan gonore atau klamidia yang ada dalam sampel urin.

Bagaimana Cara Kerja PCR?

Langkah pertama PCR adalah membuat primer. Ini adalah urutan pendek DNA yang cocok dengan ujung sampel DNA yang ingin Anda deteksi. Mereka adalah trik untuk menemukan, memperkuat, dan mendeteksi bagian DNA tertentu. Potongan DNA itu dapat digunakan untuk mengidentifikasi patogen. Ini juga dapat digunakan untuk melakukan hal-hal seperti mendeteksi gen untuk resistensi antibiotik.

Setelah Anda memiliki primer, langkah selanjutnya dalam PCR adalah memanaskan sampel sehingga DNA untai ganda terpisah menjadi dua untaian tunggal - ini disebut denaturasi. Lalu primer dikombinasikan dengan DNA sampel. Setelah ini, sebuah DNA polimerase digunakan untuk memulai replikasi DNA di lokasi primer. Akhirnya, DNA dipanaskan untuk memisahkan untaian sekali lagi. Dengan itu, seluruh proses PCR dimulai lagi.

Jumlah segmen DNA yang ada dalam sampel meningkat secara eksponensial dengan setiap siklus PCR. Dalam siklus pertama satu salinan menjadi dua. Kemudian dua salinan menjadi empat, kemudian menjadi delapan, dll. Pertumbuhan eksponensial ini berarti bahwa, umumnya, hanya 20 hingga 40 siklus diperlukan untuk menentukan apakah DNA yang dimaksud ada. (Jika DNA ada, 20-40 siklus juga cukup untuk memberikan sampel yang cukup untuk analisis).

Semua langkah dari reaksi berantai polimerase - mendenaturasi DNA, menerapkan primer, dan memperpanjang DNA - terjadi pada suhu yang berbeda. Itu berarti bahwa setelah campuran awal disatukan, langkah-langkah dapat dikontrol melalui proses yang dikenal sebagai thermocycling. Thermocycling berarti suhu dipertahankan pada tingkat yang diperlukan untuk waktu yang cukup lama untuk setiap langkah berlangsung. Dengan demikian, PCR adalah cara yang efisien untuk memperkuat jumlah DNA target. Bahkan, itu dapat dicapai dalam tabung reaksi tunggal dengan sedikit kebutuhan untuk campur tangan manusia.

Reaksi rantai polimerase mewakili revolusi dalam teknik biologis ketika pertama kali dikembangkan pada awal 1980-an. Pencipta PCR, Kary Mullis, memenangkan Hadiah Nobel Kimia untuk karyanya pada tahun 1993.

Mengapa PCR Relevan dengan Pengujian STD

Reaksi berantai polimerase, dan teknik terkait seperti reaksi berantai ligase, terbukti semakin penting untuk pengujian STD. Ini karena teknik-teknik ini dapat secara langsung mengidentifikasi sejumlah kecil DNA virus atau RNA dalam sampel. Mengidentifikasi kode genetik patogen tidak mengharuskan patogen hidup - tidak seperti kultur bakteri atau kultur virus. Ini juga tidak mengharuskan infeksi terjadi cukup lama bagi orang untuk mengembangkan reaksi antibodi yang terdeteksi (cara infeksi terdeteksi oleh ELISA.) Ini berarti bahwa teknik PCR kadang-kadang dapat mendeteksi penyakit lebih awal daripada tes lainnya. Lebih baik lagi, penyakit menular seksual dapat dideteksi tanpa perlu khawatir tentang menjaga sampel tetap hidup atau melakukan pengujian pada waktu yang tepat.